Шошқаның жедел диарея синдромының рекомбинантты протеин негізінде IgG антиденесінің коронавирусын анықтаудың жанама ИФА әдісін әзірлеу

Шошқаның жіті диарея синдромы коронавирусы (SADS-CoV) — жаңадан ашылған шошқаның ішектік патогенді коронавирусы, ол жаңа туған торайларда сулы диареяны тудыруы және шошқа шаруашылығына айтарлықтай экономикалық шығын әкелуі мүмкін.Қазіргі уақытта SADS-CoV инфекциясының және вакцинаның тиімділігін бағалаудың қолайлы серологиялық әдісі жоқ, сондықтан бұл тапшылықтың орнын толтыру үшін тиімді ферментпен байланысты иммуносорбенттік талдауды (ИФА) қолдану шұғыл қажеттілік бар.Мұнда адамның IgG Fc доменімен біріктірілген SADS-CoV спике (S) протеинін білдіретін рекомбинантты плазмид рекомбинантты бакуловирусты өндіру үшін құрастырылды және HEK 293F жасушаларында экспрессияланды.S-Fc протеині G протеинінің шайырымен тазартылады және адамға қарсы Fc және анти-SADS-CoV антиденелерімен реактивтілігін сақтайды.Содан кейін S-Fc ақуызы жанама ИФА (S-iELISA) әзірлеу және S-iELISA реакция жағдайларын оңтайландыру үшін пайдаланылды.Нәтижесінде иммунофлуоресценция талдауы (IFA) және Western blotting арқылы расталған 40 SADS-CoV теріс сарысуының OD450nm мәнін талдау арқылы шекті мән 0,3711 болып анықталды.S-iELISA сынақтарының ішіндегі және арасындағы 6 SADS-CoV оң сарысуының вариация коэффициенті (CV) барлығы 10%-дан аз болды.Кросс-реактивтілік сынағы S-iELISA шошқа вирусының басқа сарысуларымен айқаспалы реактивтілігі жоқ екенін көрсетті.Сонымен қатар, 111 клиникалық сарысу үлгісін анықтау негізінде IFA және S-iELISA жалпы сәйкестік деңгейі 97,3% құрады.Сарысудың 7 түрлі OD450nm мәні бар вирусты бейтараптандыру сынағы S-iELISA анықтаған OD450nm мәні вирусты бейтараптандыру сынағымен оң корреляцияланғанын көрсетті.Соңында S-iELISA шошқа фермасының 300 сарысу үлгілеріне жүргізілді.Басқа шошқа энтеровирустарының коммерциялық жинақтары SADS-CoV, TGEV, PDCoV және PEDV IgG оң көрсеткіштері тиісінше 81,7%, 54% және 65,3% құрайтынын көрсетті., 6%, тиісінше.Нәтижелер S-iELISA спецификалық, сезімтал және қайталанатын және шошқа өнеркәсібінде SADS-CoV инфекциясын анықтау үшін пайдаланылуы мүмкін екенін көрсетеді.Бұл мақала авторлық құқықпен қорғалған.барлық құқықтар сақталған.


Жіберу уақыты: 22 маусым-2021 ж